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臺盼藍染色法具體操作步驟:

更新時間:2025-06-12      點擊次數(shù):164
臺盼藍染色法是一種簡單快速檢測細胞活性的方法,以下是其具體操作步驟:


  1. 準備工作

    • 配制適量的臺盼藍染液,一般使用 0.4% 的臺盼藍溶液,可將 0.4 克臺盼藍粉末溶解于 100 毫升磷酸緩沖鹽溶液(PBS)中,過濾除菌后備用。

    • 準備好細胞懸液,確保細胞懸液濃度適中,若細胞濃度過高,需進行適當稀釋。

  2. 染色

    • 取適量細胞懸液(如 100 微升),加入等體積的臺盼藍染液(100 微升),輕輕吹打混勻,使細胞與染液充分接觸,室溫下染色 3 - 5 分鐘。

  3. 觀察與計數(shù)

    • 取少量染色后的細胞懸液,滴加到血細胞計數(shù)板上,蓋上蓋玻片。

    • 在顯微鏡下觀察,活細胞由于細胞膜具有完整性,能夠排斥臺盼藍,因此不著色,呈現(xiàn)透明狀;而死細胞的細胞膜失去完整性,臺盼藍可進入細胞內(nèi),使細胞染成藍色。

    • 選擇計數(shù)板上合適的區(qū)域進行細胞計數(shù),一般選取四個角的大方格和中央的大方格進行計數(shù)。分別記錄活細胞(無色)和死細胞(藍色)的數(shù)量。

  4. 計算細胞活性

    • 根據(jù)以下公式計算細胞活性:細胞活性(%)=(活細胞數(shù) / 細胞總數(shù))×100%。例如,計數(shù)得到活細胞數(shù)為 400 個,死細胞數(shù)為 100 個,則細胞總數(shù)為 500 個,細胞活性 =(400/500)×100% = 80%。



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